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高效液相色谱仪测定食品中着色剂的操作步骤

来源:未知      发布日期:2018-06-26 14:53    |     分享    加入收藏   关注:
高效液相色谱仪测定食品中着色剂的操作步骤
     深圳市亿鑫仪器设备有限公司是一家以研发、生产、销售品管检测仪器及实验室试验仪器设备为主体的高新技术企业;主要产品涵盖高效液相色谱仪、气相色谱仪、气相质谱联用仪,原子吸收分光光度计,紫外分光光度计、精密分析天平、光谱仪、ROHS检测仪、水质分析仪、测量仪器、化学分析仪器、金相显微镜,物理测量仪器、无损探伤仪、蓝光三维扫描仪、高精度三坐标、二次元、试验机及实验室常用仪器仪表等多种产品的大型专业精密仪器仪表


1  仪器与试剂
1.1 仪器
  梯度高效液相色谱仪,配紫外
  色谱柱 C18  250mm×4.6mm×5μm
  超声波水浴
  分析天平(感量0.001g)
  0.45μm水性滤膜
1.2 试剂
  甲醇,色谱纯。
  正己烷。
  聚酰胺粉(尼龙6):过200目筛
  磷酸,色谱纯。
  柠檬酸溶液:称取20克柠檬酸,加水至100mL,溶解混匀。
  乙酸铵溶液(0.02mol/L)称取1.54克乙酸铵,加水至1000mL,溶解,经经0.45μm水性滤膜过滤。
  无水乙醇-氨水-水(7+2+1):量取无水乙醇70mL、氨水20mL、水10mL混匀。
合成着色剂标准液:准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、新红、赤藓红、亮蓝、靛蓝各0.100克,置于100mL容量瓶中,加pH=6水到刻度,配成水溶液。
2  测定原理
食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液液分配法提取,制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离。
3  试样溶液的制备
称取试样5.000g-10.000g(精确至0.0001g),置于100ml烧杯中,加100ml水,用柠檬酸溶液调pH到6,加热至60度,将1克聚酰胺粉加少许水调成糊状,倒入试样溶液中,搅拌片刻,以G3垂融漏斗抽滤,用pH=4的水洗涤3-5次,然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3-5次,再用水洗至中性,用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3-5次,每次5mL,收集解吸液,加乙酸中和,蒸发至近干,加水溶解,定容至5mL。经0.45μm水性滤膜过滤,进高效液相色谱仪测定。
4  色谱条件
色谱柱:C18 250mm×4.6mm×5μm;
  流动相:以20mmol乙酸铵为流动相A,以甲醇为流动相B,按下表规定经行梯度洗脱;

时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B
0 80 20
5 65 35
15 15 85
17 2 98
22 2 98
22.1 80 20
30 80 20
 

  流速:1.0mL/min;
  温度:室温;
  进样量:20μL;
  检测波长:254nm。




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