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高效液相色谱常见故障的判定及解决方法

来源:未知      发布日期:2018-07-28 10:45    |     分享    加入收藏   关注:
高效液相色谱常见故障的判定及解决方法
     深圳市亿鑫仪器设备有限公司是一家以研发、生产、销售品管检测仪器及实验室试验仪器设备为主体的高新技术企业;主要产品涵盖高效液相色谱仪、气相色谱仪、气相质谱联用仪,原子吸收分光光度计,紫外分光光度计、精密分析天平、光谱仪、ROHS检测仪、水质分析仪、测量仪器、化学分析仪器、金相显微镜,物理测量仪器、无损探伤仪、蓝光三维扫描仪、高精度三坐标、二次元、试验机及实验室常用仪器仪表等多种产品的大型专业精密仪器仪表

故障 可能原因 解决方法
(一) 保留时间变化 1 柱温变化 柱恒温,必要时需配置恒温箱
2 等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱
3 缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液
4 柱污染 每天冲洗柱
5 柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相
6 柱快达到寿命 采用保护柱
(二) 保留时间缩短 1 流速增加 检查泵,重新设定流速
2 样品超载 降低样品量
3 键合相流失 流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向
4 流动相组成变化 防止流动相蒸发或沉淀
5 温度增加 柱恒温
(三) 保留时间延长 1 流速下降 管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡
2 硅胶柱上活性点变化 用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱
3 键合相流失 同前(二)3
4 流动相组成变化 同前(二)4
5 温度降低 同前(二)5
(四) 出现肩峰或分叉 1 样品体积过大 用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%
2 样品溶剂过强 采用较弱的样品溶剂
3 柱塌陷或形成短路通道 更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
4 柱内烧结不锈钢失效 更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品
5 进样器损坏 更换进样器转子
(五) 鬼峰 1.进样阀残余峰 每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗
2.样品中未知物 处理样品
3.柱未平衡 重新平衡柱,用流动相作样品溶剂 (尤其是离子对色谱)
4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱) 每天新配,用抗氧化剂
5.水污染(反相) 通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水
(六) 基线噪声 1 气泡(尖锐峰) 流动相脱气,加柱后背压
2 污染(随机噪声) 清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂
3 检测器灯连续噪声 更换氘灯
4 电干扰(偶然噪声) 采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)
5 检测器中有气泡 流动相脱气,加柱后背压
(七) 峰拖尾 1 柱超载 降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相
2 峰干扰 清洁样品,调整流动相
3 硅羟基作用 加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度,降低流动相PH值,钝化样品
4 同前(四)4 同前(四)4
5 同前(四)3 同前(四)3
6 死体积或柱外体积过大 连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管
7 柱效下降 用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱
(八) 峰展宽 1 进样体积过大 同(四)1
2 在进样阀中造成峰扩展 进样前后排出气泡以降低扩散
3 数据系统采样速率太慢 设定速率应使每峰大于10点
4 检测器时间常数过大 设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%
5 流动相粘度过高 增加柱温,采用低粘度流动相
6 检测池体积过大 用小体积池,卸下热交换器
7 保留时间过长 等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱
8 柱外体积过大 将连接管径和连接管长度降至最小
9 样品过载 进小浓度小体积样品



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