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带在线样品预处理的高效液相色谱仪设计方案

来源:未知      发布日期:2019-01-22 09:06    |     分享    加入收藏   关注:
带在线样品预处理的高效液相色谱仪设计方案


       由于高效液相色谱仪样品的预处理需要溶解与解析,这一切都和液体有关,所以我们以一个高效液相色谱仪的高压输液泵为平台,配上可以由计算机程序控制的多通切换阀,组成整个系统。具体的物理实施方案是:在一个高压输液泵的单元中装入一个可程控的六通阀和可以安装、连接萃取柱的柱架,作为整个样品预处理的单元。这个高压输液泵就作为萃取液的输液泵,六通阀用作萃取柱萃取和解析的切换。其实输液泵和六通阀之间并无物理上(液体流路)的连接。这个单元做出来之后就可以和常规的高效液相色谱仪组装成自动的带样品预处理的液相色谱仪。具体的液体流程图如下:
     连接的方案为:萃取输液泵的输出口连接到自动进样器(或手动进样器)的进样六通阀输入口;进样六通阀的另外4个端口维持原状不变;进样六通阀的输出口连接到萃取六通阀的萃取柱输入口;萃取柱的连接位置与进样六通阀的定量管一样;萃取六通阀另外的二个端口分别连接到分析输液泵的出口和分离色谱柱的入口(和普通高效液相色谱仪的连接无异)。以下详细说明整个系统的工作过程:
1、活化阶段
      整个系统被2个六通阀切割为三个部分,即样品接收部分(黑色)、萃取柱活化部分(红色)和分析柱平衡部分(蓝色)。此时萃取柱和分析柱可以得到充分的活化和平衡,活化和平衡的时间、流量可以由高效液相色谱仪工作站设定和控制;与此同时样品接收部分也作好了接收样品的准备。
 
2、进样阶段
      自动进样器启动(或手动进样),样品导入定量管(绿色),此时萃取柱和分析柱仍旧处于活化和平衡状态,自动进样器的启动由高效液相色谱仪工作站的程序决定和控制,从流路可以看出,现在整个流路仍旧是三大块。
 
3、萃取阶段
       进样六通阀切换,改变位置,此时萃取液将定量管中待处理的样品导入萃取柱进行萃取,萃取的流量和时间由高效液相色谱仪工作站的程序决定和控制,与此同时进样六通阀的样品导入流路由自动进样器的清洗液进行清洗,清洗的次数和清洗液体的量由高效液相色谱仪工作站控制的自动进样器控制(如是手动进样阀则手动清洗),分析柱此时仍处于平衡状态。整个流路仍是三大块。
 
4、解析阶段
       萃取六通阀切换,改变位置,溶解在萃取柱上的样品由分析输液泵的流动相慢慢洗脱,导入分析柱,值得一提的是由于解析流量很低(0.2mL/min),不会引起较高的系统压力(一般在1-2MPa),更可贵的是由于解析流量很低,待分析样品会在分析柱的柱头部分富集聚焦。与此同时整个萃取流路除萃取柱外的大部分流路得到萃取液的清洗还原;进样六通阀的样品导入管仍处于清洗阶段。解析流量、解析时间由高效液相色谱仪工作站的程序予以控制,当然萃取流路的清洗流量也可以由高效液相色谱仪工作站控制的萃取输液泵调整控制。整个流路仍是三大块。
5、分析阶段
          萃取六通阀切换,回原来位置,分析输液泵的流量由原来的萃取流量(0.2mL/min)变为分析流量(1mL/min),富集在分析柱头上的样品经分离后以单质形态流出色谱柱,由于在解析阶段,混合样品在分析柱头部分得到富集,所以现在以较高流量(1mL/min)进行分离,分离所得单质可以以较尖窄形态出现在检测器流过池内,从而可以形成较尖窄的色谱峰形。与此同时萃取流路包括萃取柱可以得到全部的清洗还原。分析输液泵的流量和萃取输液泵的流量、运行时间由高效液相色谱仪工作站调整、控制。至此一个样品的预处理和分析结束,分析结束后,系统切换到活化阶段,等待进行下一个样品的分析。


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