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高效液相色谱仪测定吡啶-3-磺酸含量

来源:未知      发布日期:2019-05-07 09:57    |     分享    加入收藏   关注:
高效液相色谱仪测定吡啶-3-磺酸含量


高效液相色谱仪测定吡啶-3-磺酸含量是深圳市亿鑫仪器设备有限公司提供。

1、检查方法:高效液相色谱仪
2、仪器与用具:高效液相色谱仪、十八烷基键合硅胶柱(5μm 250mm×4.6mm)、电子分析天平、容量瓶、移液管、烧杯,PH计。
3、试液与试药:磷酸二氢钾、磷酸、甲醇、水。
4、色谱条件:十八烷基键合硅胶柱(5μm 250mm×4.6mm);
                       紫外检测器,检测波长为261nm;
                       流动相A:0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液,用磷酸调节pH值至3.0。
                       
流动相B:甲醇,梯度进行洗脱;          
                             溶剂:流动相A;
                             流速:1.0ml/min。
5、具体试验操作:取样品适量,精密称定,置50ml量瓶中,加流动相A适量,振摇,使充分溶解,加流动相A稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
    另取
对照品适量,精密称定,加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含吡啶-3-磺酸2.5µg的溶液,作为对照品溶液。用十八烷基键合硅胶为填充剂,以0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液,用磷酸调节pH值至3.0,为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度进行洗脱,检测波长为261nm。取对照品溶液、供试品溶液各20μl注入高效液相色谱仪,记录色谱图。
    计算公式: 
                               
  (Ax为供试品溶液中吡啶-3-磺酸的峰面积,As为对照品溶液中吡啶-3-磺酸的峰面积,Wx为对照品的称样量,Px为工作对照品含量,Vx为吡啶-3-磺酸对照品溶液的稀释体积,V为供试品溶液的稀释体积,W为供试品的称样量)


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