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紫外分光光度计测定保健食品中总蒽醌的含量

来源:未知      发布日期:2019-08-10 08:49    |     分享    加入收藏   关注:
紫外分光光度计测定保健食品中总蒽醌的含量



1  范围
本方法规定了保健食品中总蒽醌的紫外分光光度计测定方法。
本方法适用于保健食品中总蒽醌的测定。
2  原理
试样经酸水解后,有机溶剂提取总蒽醌,利用羟基蒽醌衍生物在碱性溶液中显红-紫红色反应(Borntrager反应) ,采用紫外分光光度计法,以标准曲线定量检测。
3  试剂和材料
注:除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T 6682 规定的三级水。
3.1 试剂
3.1.1  盐酸(HCl)
3.1.2  氨水(NH3·H2O)
3.1.3  二氯甲烷(C2H6Cl2)
3.1.4  氢氧化钠(NaOH)
3.1.5  甲醇 (CH3OH)
3.2   试剂配制
3.2.1  25%盐酸:取盐酸68 mL,加水稀释至100 mL。 
3.2.2  4%氨溶液:取氨水16 mL,加水稀释至100 mL。 
3.2.3  10%氢氧化钠溶液:称取氢氧化钠10g,加水溶解并定容至100 mL。
3.2.4  混合碱溶液:等体积10%氢氧化钠和4%氨溶液混合。
3.3 标准品
1,8-二羟基蒽醌:纯度≥99.0%。
3.4  标准溶液的配制
1,8-二羟基蒽醌标准溶液:精密称取1,8-二羟基蒽醌标准品10mg,置25mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成0.4mg/mL的溶液。
4  仪器设备
4.1  紫外分光光度计 
4.2  天平:感量为 1 mg 和 0.1 mg。 
4.3  恒温水浴锅 
5  分析步骤
5.1 标准曲线 
分别精密吸取1,8-二羟基蒽醌标准溶液0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL于25mL容量瓶中,加混合碱溶液至刻度,混匀,于暗处放置30分钟。以混合碱溶液为空白,在525nm波长处,分别测定吸光度。以浓度(mg/mL)为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
5.2试样测定
称取已粉碎混合均匀的待测试样0.1~0.5g(相当于每g含总蒽醌2mg~17mg),精密称定,置100mL圆底烧瓶中,精密加入甲醇-盐酸(10:1)混合溶液25mL,称重,在80℃水浴中加热回流30分钟,放冷,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液15mL至分液漏斗中,加水25mL,用二氯甲烷160mL提取4次(50mL,50mL,30mL,30mL),合并二氯甲烷液,并用水洗涤至中性,弃去水洗液,二氯甲烷层转移至蒸发皿中蒸干,用甲醇将残渣溶解并转移至10mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,作为试样溶液。精密量取试样溶液2mL, 置25mL量瓶中,加混合碱溶液至刻度,混匀,置暗处放置30分钟,取出,迅速冷却至室温,称重,补加混合碱溶液到原来重量,摇匀,测定吸光度。根据回归方程计算试样中总蒽醌的含量。
6  分析结果的表述
试样中总蒽醌含量按式(1)计算:
 
                   ..........................................(1)
       
式中:
X——试样中总蒽醌的含量,单位为毫克每百克(mg/100g);
C——由标准曲线查得测定试样中总蒽醌的浓度,单位为毫克每毫升( mg/mL);
V——被测定试样的最终定容体积,单位为毫升( mL);
m——试样的称样质量,单位为克( g);
100——单位转换;
计算结果以重复条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,保留两位有效数字。 
7  精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。
 8 其他 



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