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紫外分光光度计测定保健食品中总三萜的含量

来源:未知      发布日期:2019-08-15 08:29    |     分享    加入收藏   关注:
紫外分光光度计测定保健食品中总三萜的含量



1  范围
本方法规定了保健食品中总三萜的紫外分光光度计测定方法。
本方法适用于以三萜类成分为主要原料的保健食品中总三萜含量的测定。
2  原理
试样用氯仿提取出的三萜类物质,在高氯酸的作用下与香草醛反应产生有色物质。以熊果酸为对照品,采用紫外分光光度计测定总三萜在548nm波长下的吸光度进行定量。
3  试剂和材料
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T6682 规定的一级水。
试剂
3.1.1 乙酸乙酯( CH3COOCH2CH3)。
3.1.2 氯仿(CHCl3)。
3.1.3 冰乙酸(CH3COOH)。
3.1.4 高氯酸(HClO4
3.1.5 香草醛(C8H8O3
试剂配制
5%香草醛冰乙酸溶液:此溶液临用前配制。精密称取香草醛 0.5g,加冰乙酸使溶解成 10mL,即得。
标准品
熊果酸(C30H48O3):中国食品药品检定研究院,含量:≥93.8%。
标准溶液的配制
熊果酸对照品溶液(100μg/mL):精密称取熊果酸对照品10mg,至100mL容量瓶中,加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度,摇匀。

4  仪器设备
4.1  紫外分光光度计。 
4.2  分析天平:精确至0.1 mg。
4.3  恒温水浴锅。
4.4  超声波清洗器
4.5  离心机
5  分析步骤
5.1试样制备
5.1.1 固体试样 
取一定量混匀试样,精密称定(试样中总三萜的量约为0.5~5mg),置50mL量瓶中,加氯仿约30mL,超声处理30 min,放冷,加氯仿至刻度,摇匀。 
5.1.2 油类制品 
准确称取混匀试样适量(试样中总三萜的量约为0.5~5mg),置于100 mL容量瓶中,用乙酸乙酯溶解并稀释至刻度,摇匀。
5.2 标准曲线的制作
分别精密吸取熊果酸对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0mL于蒸发皿中,于60℃水浴上蒸干,精密加入0.4mL5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿使残渣溶解,再精密加1.0mL高氯酸,混匀后移入10mL具塞比色管中,置60℃水浴加热15min,取出,冰浴冷却后,精密加入冰乙酸5.0mL摇匀,15min后以1cm比色池于548nm波长测定吸光度, 以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线。
5.3 试验溶液的测定
精密量取5.1项下试样上清液1.0mL置蒸发皿中,于60℃水浴上蒸干。照5.2标准曲线的制作项下,自“精密加入0.4mL5%香草醛冰乙酸溶液……”起,同法操作,测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中熊果酸的含量。
6  分析结果的表述
试样中总三萜含量按下式计算:

Xi-试样中总三萜含量(以熊果酸计),单位为克每百克(g/100g);
Ci-由标准曲线查得测定样液中总三萜质量,单位为微克(μg);
m-试样的称样质量,单位为克(g);
V1-试样定容总体积,单位为毫升(mL);
V2-测定用试样体积,单位为毫升(mL)。
计算结果以重复条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,保留三位有效数字。 
7  精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的 10% 。
8  其他
本方法定量限为1.5μg 



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