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高效液相色谱仪测定茶多酚中的咖啡因含量

来源:未知      发布日期:2019-09-07 13:45    |     分享    加入收藏   关注:
高效液相色谱仪测定茶多酚中的咖啡因含量


高效液相色谱仪测定茶多酚中的咖啡因含量是深圳市亿鑫仪器设备有限公司提供。

一、仪器与试剂
1.1仪器
 
高效液相色谱仪,配紫外检测器。
 
1.2色谱条件
 
色谱柱:C18 ,5 um,150mmX4.6mm
 
流动相:甲醇:0.067 mol/L ,乙酸溶液=40:60
 
流速:1.0ml/min
 
柱温:35℃
 
检测波长=286 nm
 
进样量:10出ul
 
1.3试剂
 
甲醇(HPLC),
 
三氯甲烷(A11)。
 
0.067mol/L乙酸溶液:称4.0g乙酸,用重蒸水定容1000ml。
 
咖啡因标准:准确称取0.10009咖啡因(纯度≥99.8%),用重蒸水定容1000ml,此液为1.0mg/ml。
 
二、实验方法
2.1样品处理
 
称0.25—1.0g样品于10.0 ml比色管中,加重蒸水2—3ml,再准确加入10.0ml三氯甲烷混匀,超声提取30 min,静置过夜(或者离心15 min),取下层三氯甲烷过0.45um滤膜,供色谱分析。
 
2.2标准曲线、相关系数及检出限
 
配制咖啡因浓度分别为0.00,10.00,25.00,50.000,100.00,200.00,400.00ug/ml的标准系列,然后分别进入10ul于286nm测量峰面积,制作峰面积-咖啡因浓度的标准曲线,r=09998,检出限2.0ug/ml(按仪器噪声响应值的3倍量进行计算)。
 
三、结果和讨论
3.1流动相的选择
 
用GB/T5009.139.2003所给定的流动相进行测定,标准峰出现头部分叉现象,影响测定结果,使用本法所给流动相,出峰时间快,标准峰型好。
 
3.2咖啡因的溶解性质是1 g溶于46ml水,75ml乙醇,6ml三氯甲烷,600ml醚。而茶多酚的溶解性质是溶于乙醇和乙酸乙酯,不溶于三氯甲烷。根据溶解性质的不同,能够很好地提取茶多酚中的咖啡因。
 


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