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高效液相色谱仪测定富马酸和马来酸的含量

来源:未知      发布日期:2019-09-15 11:20    |     分享    加入收藏   关注:
高效液相色谱仪测定富马酸和马来酸的含量



高效液相色谱仪法,在选定的工作条件下,通过色谱柱使样品溶液中各组分分离,用紫外吸收检测器检测,用外标法定量,计算样品中富马酸及马来酸的含量。
 
1、 试剂和材料
1.1 富马酸:质量分数≥99.0%。
 
1.2 马来酸:质量分数≥99.0%。
 
1.3 氢氧化钠溶液:20g/L。
 
1.4 磷酸溶液:量取磷酸(优级纯)(1±0.02)mL于1000mL容量瓶中,加入100mL甲醇(HPLC级,可根据柱效调整加入量),加水稀释至刻度,再经0.45μm滤膜过滤。
 
2、 仪器和设备
2.1 高效液相色谱仪系统(HPLC)
 
2.1.1 高压泵:无脉冲,能将流速保持在0.1mL/min~10.0 mL/min。
 
2.1.2 定量环:5μL。
 
2.1.3 紫外光检测器:可变波长。
 
2.1.4 数据处理系统:色谱工作站或数据处理机。
 
2.2 抽滤系统
 
抽滤系统使用孔径为 0.45μm 的纤维素酯膜滤纸(用于流动相的预处理)。
 
2.3 过滤系统
 
过滤系统使用孔径为 0.45μm 的纤维素酯膜滤纸(用于样品的预处理)。
 
2.4 进样器
 
自动进样器或微量进样器,50μL或100μL。
 
3、 色谱分析条件
推荐的色谱柱及典型色谱操作条件见表 A.1,富马酸和马来酸测定典型高效液相色谱仪图见附录 C图 C.1,各组分的相对保留时间见附录 C 表 C.1。其他能达到同等分离程度的色谱柱和色谱操作条件均可使用。
 
​4、 分析步骤
4.1 标准样品溶液的制备
 
4.1.1 富马酸标准样品溶液的制备
 
称取 50mg 富马酸,精确至 0.0002g,溶于适量水(必要时加入少量氢氧化钠溶液),转移至 50mL容量瓶,用磷酸溶液稀释至刻度。移取上述溶液(1±0.02)mL ,置于 50mL 容量瓶,用磷酸溶液稀释至刻度,摇匀,经 0.45μm 滤膜过滤,再经超声波脱气处理。
 
4.1.2 马来酸标准样品溶液的制备
 
称取 50mg 马来酸,精确至 0.0002g,溶于适量水(必要时加入少量氢氧化钠溶液),转移至 250mL容量瓶,用磷酸溶液稀释至刻度。移取上述溶液(1±0.02)mL ,置于 100mL 容量瓶,用磷酸溶液稀释至刻度,摇匀,经 0.45μm 滤膜过滤,再经超声波脱气处理。
 
4.2 样品溶液的制备
 
称取 0.2 g 实验室样品,精确至 0.0002g, 置于 50mL 容量瓶,以流动相稀释至刻度,摇匀,经0.45μm 滤膜过滤,再经超声波脱气处理。
 
4.3 测定
 
高效液相色谱仪操作规程开机预热,调节温度及流量,达到分析条件并基线平稳后,将标准样品溶液进样。用微量进样器取标准样品溶液 5μL,进样(或自动进样),记录所得的富马酸或马来酸的峰面积A 2 。
 
用微量进样器取样品溶液 5μL,进样(或自动进样),记录所得的待测物质的峰面积 A 1 。
 
5、 结果计算
富马酸或马来酸的质量分数 w 2 ,数值以%表示,按式(A.3)计算:
 
 …………………………(A.3)
 
式中:
 
A 1  —— 样品液中待测物质的峰面积;
 
A 2  —— 标准样品溶液中富马酸或马来酸的峰面积;
 
m 2  —— 标准样品溶液中富马酸或马来酸的进样量,单位为微克(μg);
 
m —— 样品的进样量,单位为微克(μg)


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