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高效液相色谱仪测定烟用添加剂中马兜铃酸A的含

来源:未知      发布日期:2019-09-30 12:16    |     分享    加入收藏   关注:
高效液相色谱仪测定烟用添加剂中马兜铃酸A的含量



一、原理
采用含0.1%甲酸的甲醇一水混合溶剂萃取烟用添加剂中的马兜铃酸A,经高效液相色谱仪分离,以紫外检测器测定,外标法定量。
 
二、试剂与材料
除特殊要求外,均使用分析纯试剂。
 
1、水,符合GB/T 6682中一级水的要求。
 
2、乙腈:色谱纯。
 
3、甲酸:色谱纯。
 
4、甲醇:色谱纯。
 
5、马兜铃酸A,纯度>97%。
 
6、甲醇水混合溶剂,体积比9:1。
 
7、萃取溶剂:取1mL甲酸于1000mL容量瓶中,用甲醇一水混合溶剂定容至刻度。
 
8、标准溶液
 
8.1、一级标准储备液:
 
称取100mg(精确至0.1mg)马兜铃酸A,用萃取溶剂溶解转移至100mL容量瓶中,定容至刻度并摇匀。在2℃~8℃下保存,有效期1个月。
 
8.2、二级标准储备液:
 
准确移取与5.0mL一级标准储备液至100mL容量瓶中,用萃取溶剂稀释定容至刻度并摇匀。在2℃~8℃下保存,有效期1个月。
 
8.3、标准工作溶液:
 
分别准确移取100uL、300uL、500uL、1000uL、2000uL、4000uL二级标准储备液至50mL容量瓶中,用萃取溶剂定容至刻度,得到系列标准工作溶液。即配即用。
 
三、仪器设备
1、高效液相色谱仪,配置柱温箱、梯度洗脱功能和紫外检测器。
 
2、分析天平,感量0.1mg。
 
3、振荡器,最大转速应不小于200r/min。
 
4、离心机,最大转速应不小于8000r/min。
 
5、有机相滤膜,0.45um。
 
四、分析步骤
1、样品处理:
 
称取2g(精确到0.1mg)试样于100ml。具塞锥形瓶中,准确加入50mL萃取溶剂,用150r/min振荡萃取10min。取3mL萃取液置于10mL具塞离心试管中,在5000r/min条件下离心10min,取1mL上清液过有机相滤膜,滤液用高效液相色谱仪分析。
 
2、色谱条件:
 
色谱柱:C18,3.5um,250mm(长度)×4.6mm(内径)
 
流动相A:0.1%的甲酸乙腈溶液(体积分数);
 
流动相B:0.1%的甲酸水溶液(体积分数);
 
柱温:35℃;
 
流速:1.0mL/min;
 
进样体积:10uL;
 
梯度洗脱程序见表1;
 
紫外检测器检测波长:393 nm。
 
3、样品测定:
 
按照仪器测试条件测定试样,每个样品平行测定两次。
 
4、结果的计算与表述
 
样品中的马兜铃酸A的含量由式(1)计算(计算结果应扣除空白值)


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